从开发能够进行高分辨基因分析的毛细管电泳无胶筛分体系入手,对以羟丙基甲基纤维素为基础的筛分介质进行研究,并予以改进和优化,对包括毛细管状态、温度、电场强度等影响DNA分离的各种因素进行了考察。
经研究开发出一系列全新的、以甘露醇添加剂为特征,具有超低粘度和高分辨率的毛细管电泳无胶筛分介质。探讨羟丙基甲基纤维素作为筛分介质的筛分性能以及各 种因素,包括羟丙基甲基纤维素的浓度和分子量、电场强度、毛细管内壁的修饰、毛细管的温度、DNA嵌入试剂、甘露醇添加剂、尿素变性剂等等,对DNA片段 分离的影响。 使用小分子量的高分子作为筛分介质分离DNA片段。以分子量为10,000g/mol的羟丙基甲基纤维素为基础,加以甘露醇改性剂,开发出一种具有超低粘 度的能够对DNA片段进行高分辨分离的无胶筛分介质。此外,由于该筛分介质的粘度和水的粘度在同一数量级,因此克服了常规粘度筛分介质难以灌入毛细管以及 会粘附于毛细管外壁从而给样品带来污染的困难。
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